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GelRed核酸染料的產(chǎn)品特性
GelRed核酸染料產(chǎn)品特性:1.高靈敏度GelRed和GelGreen是目前市場中zui靈敏的凝膠核酸染料2.GelRed核酸染料更安全艾姆斯氏試驗結(jié)果表明,該染料的誘變性遠(yuǎn)小于溴化乙錠(EB)3.穩(wěn)定性*可以使用微波爐加熱,可以在室溫下保存4.信噪比高樣品熒光信號強(qiáng),背景信號低。5.GelRed核酸染料有廣泛的適應(yīng)性適用于預(yù)制凝膠和凝膠電泳后染色6.染色過程簡單與EB一樣,在預(yù)制膠和電泳過程中不必?fù)?dān)心染料降解;而電泳后染色過程也只需30分鐘且無需脫色或沖洗,即可直接用紫外...
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2015-01-21
脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染DNA的操作過程
脂質(zhì)體2000適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細(xì)胞中,是目前條件下zui方便的轉(zhuǎn)染方法之一。轉(zhuǎn)染率高,優(yōu)于磷酸鈣法,比它高5~100倍,能把DNA和RNA轉(zhuǎn)染到各種細(xì)胞。用脂質(zhì)體2000進(jìn)行轉(zhuǎn)染時,首先需優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件,應(yīng)找出該批LR對轉(zhuǎn)染某一特定細(xì)胞適合的用量、作用時間等,對每批LR都要做:先要固定一個DNA的量和DNA/LR混合物與細(xì)胞相互作用的時間,DNA可從1~5μg和孵育時間6小時開始,按這兩個參數(shù)繪出相應(yīng)LR需用量的曲線,再選用LR和DNA兩者*的劑量,確定出轉(zhuǎn)染...
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2015-01-13
HyClone胎牛血清培養(yǎng)平滑肌細(xì)胞的兩種方法
HyClone胎牛血清培養(yǎng)血管平滑肌細(xì)胞常用的方法有貼塊法(explant)和酶解離法(enzymedisperse)。下面一起來看下這兩種方法。1、貼塊法方法:動物經(jīng)頸動脈放血后,在無菌操作下迅速取出胸腹主動脈段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3次,將凝塊洗干凈后剝除外膜的纖維脂肪層,然后縱行切開血管,刮除內(nèi)膜即內(nèi)皮細(xì)胞迅速撕下中膜內(nèi)、中層,切成約1mm寬的小條,浸泡在含血清的Hank's液中,并將撕下小組織塊種植于培養(yǎng)瓶壁。置于37℃恒溫箱,2h左右,取出培養(yǎng)瓶加入20...
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2015-01-06
纖維素酶的性質(zhì)及作用機(jī)理詳解
纖維素酶分子的大小因來源不同而不盡相同,三大類酶分子量一般在23Kda~146Kda之間。多數(shù)真菌和少數(shù)細(xì)菌的纖維素酶都受糖基化,糖基與蛋白之間以共價鍵結(jié)合,或呈可解離的絡(luò)合狀態(tài)。糖基化作用在一定程度上保護(hù)酶免受蛋白酶的水解,而纖維素酶正是由于糖基化,使其所含碳水化合物的比率在不同酶之間發(fā)生差異,導(dǎo)致酶的多形式和分子量的差別。通過比較分析,人們發(fā)現(xiàn)許多不同纖維素酶間表現(xiàn)出一定的同源性,且纖維素酶分子普遍具有類似的結(jié)構(gòu)。由球狀的催化結(jié)構(gòu)域(CD)、連接橋和纖維素結(jié)合結(jié)構(gòu)域(CB...
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2014-12-20
瓊脂糖凝膠電泳實驗之凝膠制作與點樣
一、瓊脂糖凝膠制作1、瓊脂糖凝膠濃度配制凝膠的濃度據(jù)實驗需要而變,一般在0.8%~2.0%之間,如果一次配制凝膠100ml,沒用完的凝膠可以再次融化,但隨著融化次數(shù)的增加,水分丟失也越多,凝膠濃度則會越來越高,導(dǎo)致實驗結(jié)果不穩(wěn)定,補(bǔ)水辦法:一是在容器上標(biāo)記煮膠前的刻度,煮膠后補(bǔ)充相應(yīng)的水分至原刻度;二是在煮膠前稱重,煮膠后補(bǔ)充水至原重量。粗略一點的方法是通過多次較恒定的煮膠條件得出一個經(jīng)驗補(bǔ)水值。以保證凝膠濃度基本維持在原濃度。核酸染色劑溴化乙錠(ethidiumbromid...
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2014-12-10
脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染細(xì)胞實驗材料及操作步驟
一、脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染細(xì)胞實驗材料:1、Vero細(xì)胞2、轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒3、DMEM細(xì)胞培養(yǎng)液:無血清DMEM、10%血清DMEM4、脂質(zhì)體20005、6孔細(xì)胞培養(yǎng)板二、脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染細(xì)胞實驗操作步驟:(以6孔板為例予以說明)1、細(xì)胞鋪板:轉(zhuǎn)染前一天進(jìn)行鋪板,第二天待細(xì)胞長成單層即可進(jìn)行轉(zhuǎn)染。(Vero細(xì)胞按一傳三的比例進(jìn)行傳代,一般10~12h即可。)2、溶液1:240ul無血清DMEM+10ullipofectamine2000perwell(總體積250ul)(溫育5mi...
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2014-12-05
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